Шүлтлэг фосфатаза (ALP)
Тодорхойлолт
Шүлтлэг фосфатаза нь TAB5 генийг агуулсан рекомбинант E. coli омогоос гаралтай.Фермент нь ДНХ ба РНХ фосфомоноэфирийн 5´ ба 3´ төгсгөлийн фосфоржилтыг хурдасгадаг.Мөн рибоз, түүнчлэн дезоксирибонуклеозид трифосфатыг (NTPs ба dNTPs) гидролиз болгодог.TAB5 шүлтлэг фосфатаза нь 5´ цухуйсан, 5´ хонхорхой, мохоо үзүүрт ажилладаг.Фосфатаза нь ДНХ эсвэл РНХ-ийн фосфоржуулсан төгсгөлийг арилгахын тулд клончлох эсвэл датчикийн төгсгөлийн шошгололт гэх мэт олон молекул биологийн хэрэглээнд ашиглаж болно.Клончлох туршилтуудад фосфоржилт нь шугаманжуулсан плазмидын ДНХ-ийг өөрөө холбохоос сэргийлдэг.Энэ нь мөн ДНХ-ийн дараалалд загвар бэлтгэхийн тулд ПГУ-ын урвалын нэгдлээгүй dNTP-ийг доройтуулж болно.70°С-т 5 минутын турш халаахад фермент бүрэн бөгөөд эргэлт буцалтгүй идэвхгүй болдог тул холбохоос өмнө фосфатазыг зайлуулах эсвэл төгсгөлийн шошго хийх шаардлагагүй болно.
Химийн бүтэц
Тодорхойлолт
| Туршилтын зүйлс | Үзүүлэлтүүд |
| Ферментийн үйл ажиллагаа | 5U / мкл |
| Цэвэр байдал | ≥ 95% |
| Эндонуклеазын үйл ажиллагаа | Илрүүлэх боломжгүй |
| Экзонуклеазын үйл ажиллагаа | Илрүүлэх боломжгүй |
| Ник хийх үйл ажиллагаа | Илрүүлэх боломжгүй |
| RNase үйл ажиллагаа | Илрүүлэх боломжгүй |
| E.coli ДНХ | ≤1хуулбар/5U |
| Эндотоксин | LAL-Тест, ≤ 10EU/мг |
Тээвэрлэлт, хадгалалт
Тээвэр:Мөсөн савнууд
Хадгалах:-25~-15°С хэмд хадгална (давтан хөлдөөх, гэсгээхгүй байх)
Санал болгож буй дахин туршилтын хугацаа:2 жил
