Bst 2.0 ДНХ полимераз (Глицеролгүй, өндөр нягтралтай)
Bst ДНХ полимераза V2 нь Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I-ээс гаралтай бөгөөд 5′→3′ ДНХ полимераза идэвхжилтэй, гинжийг орлуулах хүчтэй боловч 5′→3′ экзонуклеазын идэвхжилгүй.Bst DNA Polymerase V2 нь хэлхээний шилжилт, изотерм өсгөлтийн LAMP (Loop mediated isothermal amplification) болон хурдан дараалалд нэн тохиромжтой.Энэхүү Bst DNA polymerase V2 нь өрөөний температурт ДНХ полимеразын идэвхийг дарангуйлах чадвартай бөгөөд ингэснээр өрөөний температурт ажиллаж, урвалын системийг боловсруулж, өвөрмөц бус олшрохоос сэргийлж, урвалын үр ашгийг дээшлүүлдэг. лиофильжих.Нэмж дурдахад, энэ нь өндөр температурт үйл ажиллагаагаа суллах чадвартай тул тусдаа идэвхжүүлэх алхам хийх шаардлагагүй болно.
Бүрэлдэхүүн хэсгүүд
| Бүрэлдэхүүн хэсэг | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ДНХ полимераз V2 (Глицерол агуулаагүй) (32U/мкл) | 0.05 мл | 0.25 мл | 2.5 мл |
| 10×HC Bst V2 буфер | 1.5 мл | 2 × 1.5 мл | 3х10 мл |
| MgSO4 (100 мм) | 1.5 мл | 2 × 1.5 мл | 2 × 10 мл |
Хэрэглээ
1.LAMP изотермийн олшруулалт
2.ДНХ-ийн хэлхээний нэг шилжилтийн урвал
3.Өндөр GC генийн дараалал
4.Нанограмм түвшний ДНХ-ийн дараалал.
Хадгалах нөхцөл
0°С-аас доош температурт тээвэрлэж, -25°C~-15°C хэмд хадгална.
Нэгжийн тодорхойлолт
Нэг нэгж нь 65°С-т 30 минутын дотор 25 нмоль dNTP-ийг хүчилд уусдаггүй материалд оруулах ферментийн хэмжээг хэлнэ.
LAMP урвал
| Бүрэлдэхүүн хэсгүүд | 25 мкЛСистем |
| 10×HC Bst V2 буфер | 2.5 мкл |
| MgSO4 (100 мм) | 1.5 мкл |
| dNTPs (тус бүр 10мМ) | 3.5 мкл |
| SYTO™ 16 Ногоон (25×)a | 1.0 мкл |
| Праймер хольцb | 6 мкл |
| Bst ДНХ Полимераз V2 (Глицеролгүй) (32 U/uL) | 0.25 мкл |
| Загвар | × μл |
| ddH₂O | 25 мкл хүртэл |
Тэмдэглэл:
1) а.SYTOTM 16 Ногоон (25×): Туршилтын хэрэгцээний дагуу бусад будагч бодисыг орлуулагч болгон ашиглаж болно;
2) б.Праймер хольц: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB болон бусад хэмжээг холих замаар олж авна.
Урвал ба нөхцөл байдал
1 × HC Bst V2 буфер, инкубацийн температур 60 ° C-аас 65 ° C хооронд байна.
Дулаан идэвхгүйжүүлэх
80 ° C, 20 минут.
