Нэг алхам RT-qPCR датчикийн хэрэгсэл
Тодорхойлолт
One Step qRT-PCR Probe Kit нь РНХ (жишээ нь вирусын РНХ)-ийг загвар болгон шууд ашигладаг qPCR-д тусгайлан зориулагдсан.Генийн тусгай праймерыг (GSP) ашиглан урвуу транскрипц болон qPCR-ийг нэг хуруу шилэнд хийж дуусгах боломжтой бөгөөд энэ нь пиптинг хийх процедур болон бохирдох эрсдлийг эрс багасгадаг.qRT-ПГУ-ын үр ашиг, мэдрэмжинд нөлөөлөхгүйгээр 55℃ температурт идэвхгүйжүүлж болно.Нэг алхамын qRT-PCR датчикийн иж бүрдлийг Мастер Микс-д өгсөн.5 × One Step Mix нь оновчтой буфер болон dNTP/dUTP холимог агуулсан бөгөөд флюресценцтэй датчик (жишээ нь TaqMan) дээр суурилсан өндөр нарийвчлалтай илрүүлэх системд тохиромжтой.
RT-qPCR-ийн үндсэн зарчмууд
Тодорхойлолт
Туршилтын зүйлс | Тодорхойлолт | Үр дүн |
(SDS PAGE) Ферментийн нөөцийн цэвэр байдал (SDS PAGE) | ≥95% | Дамжуулах |
Эндонуклеазын үйл ажиллагаа | Илрүүлээгүй | Дамжуулах |
Exodulease үйл ажиллагаа | Илрүүлээгүй | Дамжуулах |
Rnase үйл ажиллагаа | Илрүүлээгүй | Дамжуулах |
Үлдэгдэл E.coli ДНХ | <1хувь/60 | Дамжуулах |
Функциональ шинжилгээ-систем | 90%≤110% | Дамжуулах |
Бүрэлдэхүүн хэсгүүд
Бүрэлдэхүүн хэсгүүд | 100рхнс | 1000 рун | 5000 rxns |
RNase агуулаагүй ddH2O | 2*1 мл | 20 мл | 100 мл |
5 * нэг алхам холих | 600 мкл | 6*1 мл | 30 мл |
Нэг үе шаттай ферментийн холимог | 150 мкл | 2 * 750 мкл | 7.5 мл |
50* ROX лавлагаа Будаг 1 | 60 мкл | 600 мкл | 3 * 1 мл |
50* ROX лавлагаа Будаг 2 | 60 мкл | 600 мкл | 3 * 1 мл |
а.Нэг шаттай буферт dNTP Mix болон Mg2+ орно.
б.Ферментийн холимог нь голчлон урвуу бодис агуулдаг
транскриптаза, Hot Start Taq ДНХ полимераза (эсрэгбиеийн өөрчлөлт) болон RNase дарангуйлагч.
в.Янз бүрийн худгийн хоорондох флюресцен синальуудын алдааг засахад ашигладаг.
г.ROX: Та туршилтын хэрэгслийн загварын дагуу тохируулгыг сонгох хэрэгтэй.
Хэрэглээ
QPCR илрүүлэх
Хүргэлт ба хадгалалт
Хүргэлт:Мөсөн савнууд
Хадгалах нөхцөл:-20 хэмд хадгална.
Shief Life:18 сар