Хэт нуклеаз
UltraNuclease нь Serratia marcescens-аас гаралтай генетикийн инженерчлэгдсэндонуклаз бөгөөд энэ нь ДНХ эсвэл РНХ, давхар эсвэл нэг судалтай, шугаман эсвэл дугуй хэлбэртэй, өргөн хүрээний нөхцөлд нуклейн хүчлийг 5'-монофосфатын олигонуклеотид урттай бүрэн задлах чадвартай. .Генийн инженерчлэлийн өөрчлөлтийн дараа уг бүтээгдэхүүнийг гэдэсний савханцар (E. coli)-д исгэж, ялгаж, цэвэршүүлсэн бөгөөд энэ нь эсийн супернатантын зуурамтгай чанар, эсийн лизисын шинжлэх ухааны үндэслэлгүй судалгаагаар уургийн цэвэршүүлэх үр ашиг, функциональ судалгааг сайжруулдаг.Үүнийг мөн генийн эмчилгээ, вирус цэвэршүүлэх, вакцин үйлдвэрлэх, уураг, полисахарид эмийн үйлдвэрт үндсэн үлдэгдэл нуклейн хүчлийг зайлуулах урвалж болгон ашиглаж болно.
Бүтээгдэхүүний онцлог
| CAS дугаар | 9025-65-4 |
| EC дугаар. | |
| Молекулын жин | 30 кДа |
| Изоэлектрик цэг | 6.85 |
| Уургийн цэвэр байдал | ≥99%（ SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Тодорхой үйл ажиллагаа | ≥1.1 × 106U / мг |
| Хамгийн оновчтой температур | 37°C |
| Хамгийн оновчтой рН | 8.0 |
| Протеазын үйл ажиллагаа | сөрөг |
| Биологийн ачаалал | ＜10CFU/100,000U |
| Үлдэгдэл хост эсийн уураг | ≤10ppm |
| Хүнд метал | ≤10ppm |
| Бактерийн эндотоксин | ＜0.25EU/1000U |
| Хадгалах буфер | 20мМ Tris-HCl, рН 8.0, 2мМ MgCl2, 20мМ NaCl, 50% глицерин |
Хадгалах нөхцөл
≤0°C тээвэрлэх;-25~-15°C Хадгалах, 2 жилийн хүчинтэй (хөлдөх гэсгээхээс сэргийлнэ).
Нэгжийн тодорхойлолт
△A260-ийн шингээлтийн утгыг 30 минутын дотор 37 °C, рН 8.0, олигонуклеотид болгон хуваасан 37μg хулд загасны эр бэлгийн эсийн ДНХ-тэй тэнцэхүйц 30 минутын дотор 1.0-р өөрчлөхөд ашигласан ферментийн хэмжээг идэвхтэй нэгж (U) гэж тодорхойлсон.
Чанарын шалгалт
Үлдэгдэл хост эсийн уураг: ELISA иж бүрдэл
•Протеаз Үлдэгдэл: 250KU/мл UltraNuclease нь субстраттай 60 минутын турш урвалд орсон, идэвхжил илрээгүй.
•Бактерийн эндотоксин: LAL-Test, Бүгд Найрамдах Хятад Ард Улсын Фармакопея 4-р боть (2020 оны хэвлэл) гель хязгаарлах туршилтын арга.Ерөнхий дүрмүүд (1143).
•Биологийн ачаалал: Бүгд Найрамдах Хятад Ард Улсын Фармакопейн 4-р боть (2020 оны хэвлэл) - Ерөнхий
Ариутгалын туршилтын дүрэм (1101), БНХАУ-ын үндэсний стандарт, GB 4789.2-2016.
•Хүнд метал:ICP-AES, HJ776-2015.
Үйл ажиллагаа
SDS-ийн концентраци 0.1% буюу EDTA-аас дээш байх үед UltraNuclease-ийн үйл ажиллагаа мэдэгдэхүйц дарагдсан
агууламж 1 мм-ээс их байсан. Surfactant Triton X- 100, Tween 20, Tween 80 нь нуклеазад ямар ч нөлөө үзүүлээгүй.
агууламж 1.5% -иас бага байх үед шинж чанарууд.
| Үйл ажиллагаа | Хамгийн оновчтой ажиллагаа | Хүчин төгөлдөр үйл ажиллагаа |
| Температур | 37℃ | 0-45℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0-11.0 |
| Mg2+ | 1-2 мм | 1-15 мм |
| ДТТ | 0-100 мм | >100 мм |
| 2 - Меркаптоэтанол | 0-100 мм | >100 мм |
| Моновалент металлын ион (Na+, K+ гэх мэт) | 0-20 мм | 0-200 мм |
| PO43- | 0-10 мм | 0-100 мм |
Хэрэглээ ба тун
• Вакцины бүтээгдэхүүнээс экзоген нуклейн хүчлийг зайлуулж, нуклейн хүчлийн үлдэгдэл хордлогын эрсдлийг бууруулж, бүтээгдэхүүний аюулгүй байдлыг сайжруулна.
• Нуклейн хүчлийн нөлөөгөөр тэжээлийн шингэний зуурамтгай чанарыг бууруулж, боловсруулах хугацааг богиносгож, уургийн гарцыг нэмэгдүүлнэ.
• Бөөрөнхийлсөн бөөмс (вирус, агуулагдах бие гэх мэт) -ийг тустай нуклейн хүчлийг зайлуулна.
бөөмсийг ялгаруулах, цэвэршүүлэх.
| Туршилтын төрөл | Уургийн үйлдвэрлэл | Вирус, вакцин | Эсийн эм |
| Нүдний дугаар | 1г эсийн нойтон жин (10 мл буферээр дахин түдгэлзүүлсэн) | 1л исгэх шингэн супернатант | 1л өсгөвөр |
| Хамгийн бага тун | 250U | 100U | 100U |
| Зөвлөмж болгож буй тун | 2500U | 25000U | 5000U |
• Нуклеазын боловсруулалт нь баганын хроматографи, электрофорез болон blotting шинжилгээнд зориулж дээжийн нягтрал болон сэргэлтийг сайжруулна.
• Генийн эмчилгээнд нуклейн хүчлийг зайлуулж, цэвэршүүлсэн адено-холбоотой вирүс гарган авдаг.
