Ultra Nuclease GMP зэрэглэл
Муур дугаар: HC2016A
UltraNuclease GMP зэрэглэлийг генийн инженерчлэлээр боловсруулж, GMP орчинд бэлтгэж, гэдэсний савханцар (E.coli)-д илэрхийлж, цэвэршүүлдэг.Энэ нь шинжлэх ухааны судалгаанд эсийн дээд давхарга болон эсийн лизатын зуурамтгай чанарыг бууруулж, уураг цэвэршүүлэх үр ашгийг нэмэгдүүлж, уургийн үйл ажиллагааны судалгааг сайжруулдаг.Энэхүү бүтээгдэхүүн нь нуклейн хүчлийн үлдэгдлийг pg зэрэглэл болгон бууруулж, вирус цэвэршүүлэх, вакцин үйлдвэрлэх, уураг/полисахаридын эмийн үйлдвэрлэл зэрэг хэрэглээний биологийн бүтээгдэхүүний гүйцэтгэл, аюулгүй байдлыг сайжруулж чадна.Нэмж дурдахад, уг бүтээгдэхүүнийг эсийн эмчилгээ, вакцин боловсруулахад хүний захын цусны мононуклеар эсүүд (PBMC) бөөгнөрөхөөс урьдчилан сэргийлэх зорилгоор хэрэглэж болно.
UltraNuclease нь ариутгасан урвалж хэлбэрээр, буферт (20мМ Tris-HCL рН 8.0, 2мМ MgCl, 20мМ NaCl, 50% глицерин) ялгаруулж, өнгөгүй, тунгалаг шингэн хэлбэртэй байдаг.Энэхүү бүтээгдэхүүн нь GMP процессын шаардлагын дагуу үйлдвэрлэгдсэн бөгөөд шингэн хэлбэрээр хангагдсан.
Бүрэлдэхүүн хэсгүүд
UltraNuclease GMP зэрэглэл (250 U/μL)
Хадгалах нөхцөл
Бүтээгдэхүүнийг хуурай мөстэй хамт тээвэрлэж, -25°C~-15°C хэмд хоёр жилийн турш хадгалах боломжтой.
Хэрэв бүтээгдэхүүнийг онгойлгож, 4 хэмийн температурт долоо хоногоос дээш хугацаагаар хадгалсан бол шүүж хэрэглэхийг зөвлөж байнабичил биетний бохирдлоос урьдчилан сэргийлэх бүтээгдэхүүн.
Үзүүлэлтүүд
| Илэрхийллийн хост | UltraNuclease гентэй рекомбинант E. coli |
| Молекулын жин | 26.5 кДа |
| цахилгаан цэг | 6.85 |
| Цэвэр байдал | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Хадгалах буфер | 20мМ Tris-HCL рН 8.0, 2мМ MgCl, 20мМ NaCl, 50% глицерин |
|
Нэгжийн тодорхойлолт | Нэг үйл ажиллагааны нэгжийн тодорхойлолт (U) нь ашигласан ферментийн хэмжээ юм30 минутын дотор ΔA260-ийн шингээлтийн утгыг 2. 625 мл-т 1.0-р өөрчлөх.37℃ температурт рН 8.0 (бүрэн шингэцтэй тэнцэх) урвалын систем37 мкг хулд эр бэлгийн эсийн ДНХ-ийг олигонуклеотид болгон хувиргана). |
Зааварчилгаа
1. Дээж Цуглуулга
Наалдсан эсүүд: орчинг зайлуулж, эсийг PBS-ээр угааж, дээд давхаргыг зайлуулна.
Түдгэлзүүлсэн эсүүд: центрифуг хийх замаар эсийг цуглуулж, эсийг PBS-ээр угааж, 6000 хэмд центрифуг хийнэ.10 минутын турш rpm, үрэл цуглуулна.
Escherichia coli: центрифуг хийх замаар бактерийг цуглуулж, PBS-ээр нэг удаа угааж, 8000 хэмд центрифуг хийнэ.5 минутын турш эргэлдэж, үрэл цуглуулна.
2. Дээжийн эмчилгээ
Цуглуулсан эсийн үрэлийг масс(г)-ийн эзэлхүүн(мл)1:(10-20) харьцаатай лизис буферээр, эсвэл механик эсвэл химийн аргаар мөсөн дээр эсвэл өрөөний температурт (1г эсийн үрэл ойролцоогоор агуулдаг) эмчилнэ.
109 нүд).
3. Ферментийн эмчилгээ
Урвалын системд 1-5мМ MgCl нэмээд рН-ийг 8-9 болгож тохируулна.
1 г эсийн үрлэн шингээж авахын тулд 250 нэгжийн харьцаатай UltraNuclease нэмж, 37 хэмд 30 минутаас илүү хугацаанд өсгөвөрлөнө.Сонгохын тулд "Санал болгож буй урвалын хугацаа" маягтыг харна ууэмчилгээний үргэлжлэх хугацаа.
4. Супернатант Цуглуулга
12000 эрг/мин-д 30 минутын турш центрифуг хийж, дээд давхаргыг цуглуулна.
Анхаарна уу: Хэрэв уусмал нь хүчиллэг, шүлтлэг эсвэл давс, угаалгын нунтаг, эсвэл өндөр агууламжтай байвалденатурант бол ферментийн тунг нэмэгдүүлэх эсвэл эмчилгээний хугацааг уртасгана уу.
Санал болгож буй урвалын нөхцөлons
| Параметр | Хамгийн оновчтой нөхцөл | Үр дүнтэй агааржуулагч |
| Mg²+Баяжмал | 1-5 мм | 1-10 мм |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температур | 37℃ | 0-42 хэм байна |
| DTT баяжуулалт | 0-100 мм | >0 мм |
| Меркаптоэтанолын концентраци | 0-100 мм | >0 мм |
| Моновалент катионы концентраци | 0-20 мм | 0-150 мм |
| Фосфатын агууламж | 0-10 мм | 0-100 мм |
Санал болгож байна Урвал Цаг хугацаа (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ультрануклеазын хэмжээ (эцсийн концентраци) | Урвалын хугацаа |
| 0.25 U/мл | >10 цаг |
| 2.5 U/мл | >4 цаг |
| 25 U/мл | 30 мин |
Тэмдэглэл:
Эрүүл мэнд, аюулгүй байдлыг хангах үүднээс лабораторийн цув, бээлий гэх мэт шаардлагатай ХХХ-ийг өмсөнө үү!
