2×HiF Taq ба Мастер Микс
Муур дугаар: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Будагтай) нь Plus HIF ДНХ Полимераз, dNTP болон оновчтой буфер агуулсан, хэрэглэхэд бэлэн 2 × урьдчилан хольсон уусмал юм.Өрөөний температурт полимеразын үйл ажиллагаа болон 3′→5′экзонуклеазын идэвхийг дарангуйлдаг хоёр моноклональ эсрэгбиемийг хялбар бөгөөд өндөр өвөрмөц Hot Start ПГУ-ын үндсэн холимогт нэмдэг.Мастер холимогт өргөтгөлийн хүчин зүйлийг нэмж, ферментийг урт фрагмент өсгөх чадварыг өгдөг, олшруулалтын урт нь 13 кб хүртэл байж болно, фермент нь 5′→3′ ДНХ полимеразын идэвхжилтэй, 3′→5′ экзонуклеазын идэвхжил нь Так ДНХ полимеразаас 83 дахин, энэ нь энгийн ДНХ полимеразаас 9 дахин их байдаг.Энэ нь нарийн төвөгтэй загваруудыг олшруулахад тохиромжтой, олшруулах бүтээгдэхүүн нь мохоо төгсгөл юм.
2×HIF Taq plus Master Mix(With Dye) нь хурдан бөгөөд хялбар, өндөр мэдрэмжтэй, хүчтэй өвөрмөц чанар, сайн тогтвортой байдал гэх мэт давуу талтай бөгөөд урвалын системд зөвхөн праймер болон загвар нэмэх шаардлагатай бөгөөд үүнийг хоёр ширхэгээр нэмэгдүүлэх боломжтой. алхам протокол, туршилтын алхмуудыг хялбарчилж, цаг хэмнэх.Энэхүү бүтээгдэхүүн нь электрофорезын индикатор будагч бодис агуулсан бөгөөд ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг шууд электрофорез хийхэд ашиглаж болно.Нэмж дурдахад, бүтээгдэхүүн нь тусгай хамгаалалтын бодис агуулдаг бөгөөд ингэснээр мастер хольц нь олон удаа хөлдөөх, гэсгээх үед тогтвортой үйл ажиллагааг хадгалах боломжтой.
Хадгалах нөхцөл
Бүтээгдэхүүнийг -25~-15℃ хэмд 1 жил хадгална.
Үзүүлэлтүүд
| Бүтээгдэхүүний үзүүлэлт | Мастер холимог |
| Төвлөрөл | 2× |
| Халуун эхлэл | Суулгасан халуун эхлэл |
| Хэт их | Бүтэн |
| Урвалын хурд | Хурдан |
| Хэмжээ (эцсийн бүтээгдэхүүн) | 13 кб хүртэл |
| Тээвэрлэлтийн нөхцөл | Хуурай мөс |
| Бүтээгдэхүүний төрөл | Өндөр чанартай ПГУ-ын премикс |
Зааварчилгаа
1.ПГУ-ын урвалын систем
| Бүрэлдэхүүн хэсгүүд | Эзлэхүүн (μл) |
| ДНХ загвар | Тохиромжтой |
| Урагшаа праймер (10 мкмоль/л) | 2.5 |
| Урвуу праймер (10 мкмоль/л) | 2.5 |
| 2×HIF Taq нэмэх Мастер Микс | 25 |
| ddH2O | 50 хүртэл |
2.Төрөл бүрийн загваруудыг ашиглахыг зөвлөж байна
| Загварын төрөл | Фрагментуудыг 1кб-ээс 10 кб хүртэл өсгөх |
| Геномын ДНХ | 50-200 нг |
| Плазмид эсвэл вирусын ДНХ | 10пг-20нг |
| cDNA | 1-2.5 мкл (Эцсийн ПГУ-ын урвалын эзэлхүүний 10% -иас хэтрэхгүй) |
3.Олшруулах протокол
1) Хоёр шаттай протокол (нарийн төвөгтэй байдлын загвар)
| Циклийн алхам | Температур. | Цаг хугацаа | Цикл |
| Анхны денатураци | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатураци | 98℃ | 10 сек | 30-35 |
| Өргөтгөл | 68℃ | 30 сек/кб | |
| Эцсийн өргөтгөл | 72℃ | 5 мин | 1 |
2) Гурван шаттай протокол (ердийн протокол)
| Циклийн алхам | Температур. | Цаг хугацаа | Цикл |
| Анхны денатураци | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатураци | 98℃ | 10 сек | 30-35 |
| Хатаах | 60℃ | 20 сек | |
| Өргөтгөл | 72℃ | 30 сек/кб | |
| Эцсийн өргөтгөл | 72℃ | 5 мин | 1 |
3) Градиентын протокол (нарийн төвөгтэй байдлын загвар)
| Циклийн алхам | Температур | Цаг хугацаа | Цикл |
| Анхны денатураци | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатураци | 98℃ | 10 сек | 15 (Нэг мөчлөгт 1℃ бууралт) |
| Градиент анивчилгаа | 70-55℃ | 20 сек | |
| Өргөтгөл | 72℃ | 30 сек/кб | |
| Денатураци | 98℃ | 10 сек |
20 |
| Хатаах | 55℃ | 20 сек | |
| Өргөтгөл | 72℃ | 30 сек/кб | |
| Эцсийн өргөтгөл | 72℃ | 5 мин | 1 |
Өөр өөр олшруулалтын протоколын дагуу онцлог
| Протокоl | Хоёр шаттай | Гурван шаттай | Градиент анивчилгаа |
| Spec. | хурдан | дунд | удаан |
| Онцлог байдал | өндөр | дунд | өндөр |
| ПГУ-ын гарц | дунд | өндөр | дунд |
| Илрүүлэх түвшин | өндөр | дунд | өндөр |
Тэмдэглэл
Эрүүл мэнд, аюулгүй байдлыг хангахын тулд шаардлагатай хувийн хамгаалалтын хэрэгсэл, лабораторийн цув, бээлий зэргийг өмсөнө үү!
