DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Муурын дугаар: HC4007B
DNase I нь нэг буюу хоёр судалтай ДНХ-г шингээх чадвартай эндонуклеаз юм.Энэ нь 5'-фосфатын бүлэг ба 3'-OH бүлэг агуулсан моно-болон олигодеоксинуклеотидыг үүсгэхийн тулд фосфодиэфирийн холбоог гидролиз болгож чаддаг.DNase I-ийн оновчтой ажиллах рН нь 7-8 байна.DNase I-ийн идэвхжил нь Ca-аас хамаарна2+мөн CO зэрэг хоёр валенттай металлын ионуудаар идэвхжиж болно2, Mn2+, Zn2+, гэх мэт Mg-ийн дэргэд2+, DNase Би давхар судалтай ДНХ-ийн аль ч сайтыг санамсаргүй байдлаар задалж чадна;Мн байлцаж байхдаа2+, DNase I ДНХ-ийг нэг хэсэгтээ хоёр судалтай тасалж, 1-2 нуклеотид цухуйсан мохоо төгсгөлүүд эсвэл наалдамхай үзүүрүүдийг үүсгэдэг.Үүнийг янз бүрийн РНХ-ийн дээжийг боловсруулахад ашиглаж болно.
Бүрэлдэхүүн хэсгүүд
| Нэр | 1KU | 5KU |
| Рекомбинант DNaseI (RNase агуулаагүй) | 500 мкл | 5 × 500 мкл |
| DNase I урвалын буфер (10×) | 1 мл | 5 × 1 мл |
Хадгалах нөхцөл
Энэ бүтээгдэхүүнийг -25~-15℃ хэмд 2 жил хадгална.Давтан хөлдөөх гэсгээхээс зайлсхий.
Зааварчилгаа
Зөвхөн лавлагааны зорилгоор РНХ дээжээс ДНХ-г арилгахад хэрэглэнэ.
1. Дараах урвалын системийг бэлтгэхийн тулд RNase агуулаагүй центрифугийн хоолой ба пипеткийн үзүүрийг ашиглана уу.
| Бүрэлдэхүүн хэсгүүд | Эзлэхүүн (μл) |
| DNase I урвалын буфер (10×) | 1 |
| Рекомбинант DNasel (RNase агуулаагүй) | 1 |
| РНХ | X |
| RNase агуулаагүй ddH2O | 10 хүртэл |
2. Урвалын нөхцөл дараах байдалтай байна: 37℃, 15-30 минутын дараа 2.5 мм EDTA уусмалын эцсийн концентрацийг нэмээд сайтар холино, дараа нь 65℃-т 10 минут байлгана.Боловсруулсан загварыг дараагийн RT-PCR эсвэл RT-qPCR туршилтуудад ашиглаж болно.
Тэмдэглэл
1. DNase l нь физик денатурацид мэдрэмтгий байдаг;Холихдоо туршилтын хоолойг зөөлөн эргүүлж басайн сэгсэрнэ, хүчтэй сэгсэрч болохгүй.
2. Ферментийг хэрэглэхдээ мөсөн саванд эсвэл мөсөн ваннд хадгалах ба хэрэглэсний дараа шууд -20℃ хэмд хадгална.
3. Энэхүү бүтээгдэхүүн нь зөвхөн судалгааны зориулалттай.
4. Аюулгүй байдлын үүднээс лабораторийн цув, нэг удаагийн бээлийтэй ажиллана уу.
